Autoklavesterilisering involverer tre forskellige stadier:
Luftfjernelse: I denne indledende fase fjerner autoklaven luft fra kammeret. En vakuumpumpe suger luften ud og skaber et lavtryksmiljø. Dette trin sikrer, at damp effektivt kan trænge ind i alle områder og nå belastningen for korrekt sterilisering.
Sterilisering: Når luften er fjernet, når temperaturen inde i autoklaven det korrekte niveau. Mættet damp, genereret under tryk, dræber bakterier, vira og andre mikroorganismer. Den sædvanlige temperatur for sterilisering er 121 grader ved et tryk på 1,1 kg/cm² (svarende til 15 pund/square inch (lb/in²)). Varigheden af autoklavering varierer afhængigt af belastningens volumen, men anses generelt for at være 15-20 minutter.
Køling/tørring: Efter sterilisering frigives dampen, og autoklaven afkøles. Når temperaturen er sikker, åbnes døren, og de steriliserede genstande er klar til brug.
Effektiv luftfjernelse, korrekt placering af artikler og tilstrækkelig opvarmningstid er afgørende for vellykket autoklavesterilisering.